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怎样诊断生殖器疱疹

疱疹的诊断需要根据医学临床表现和病史及实验数据而定,下面介绍几种诊断生殖器疱疹的方法。

  感染的诊断要依据病史、临床表现和实验室检查结果而定。有不洁性交史,而且在生殖器部位出现皮肤红斑和原发性水疱,易复发等不难诊断。必要时可作疱液涂片,培养、接种、免疫荧光检查。血清免疫抗体测定等,均有助于诊断和确定病毒类型。

  一、细胞学方法

  对皮损刮片做Wright-Gemsa (Tzanck试验)或Papanicolaou染色,可检出HSV感染特征的巨细胞包函体,但不能区别HSV感染或水痘 — 带状疱疹病毒感染,敏感性仅为病毒分离的60%。

  二、培养法

  从水疱底部取材做组织培养分离病毒,为目前较敏感、最特异的检查方法,需5-10天,因其技术条件要求高,价格昂贵,不能普遍使用。

  三、抗体检测

  目前最广泛的是HSV-2抗体检测,如蛋白印迹法也可用gD2作抗原检测HSV-2抗体,具有敏感性,且能区分HSV-1和HSV-2的优点。

  四、基因诊断

  (一)用PCR分型检测单纯疱疹病毒

  PCR是一种敏感性高,特异性强的快速检测方法,标本中含有1fg HSV-DNA就可以检出,其在HSV感染的诊断研究中发展较快,且分型检测HSV是发展的趋势。

  1、标本采集和处理

  (1)标本采集

  ①脑脊液:直接无菌采取患者0.5ml脑脊液标本于无菌试管送检。如肉眼可见血色,应离心取上清。

  ②羊水及婴儿血清: 同上,应避免溶血

  ③脑组织: 脑组织尸检、活检标本, 加1ml PBS标本缓冲液研磨后,待检。

  ④眼及皮肤病灶分泌物:用预测(半干)棉拭子直接取患处分泌物, 置1ml PBS标本缓冲液中送检。

  ⑤生殖器(宫颈、阴道、外阴、阴茎)标本:先用消毒棉拭子擦去病变部位表面粘液、污垢,再用预潮棉拭子用力擦拭患处分泌物,置1ml PBS标本缓冲液中送检。

  (2)标本处理

  ①预处理:所有液体标本均可直接进行模板制备;可以取100μl标本液,离心5000 r/ min×5min后,去上清,取沉淀物进行模板制备。

  ②模板制备:a: 蛋白酶K消化裂解法:沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液,55℃1 h后,煮沸10 min,离心5000 r/ min×5min,收集上清。 b: 水煮法:沉淀物加100μl蒸馏水,摇均水煮20 min,离心5000 r/ min×5min收集上清。c: 1%Triton X-100裂解法:取采集的标本液100μl,加入1μl Triton X-100,水煮20 min,5000 r/ min×5min,收集上清。d: 5%NP-40裂解法:取采集的标本液100μl,加5μl NP-40,水煮20 min ,5000 r/ min×5min收集上清。e: 如标本溶血严重经上述裂解处理后,再加等体积酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀DNA,加10μl DW溶解待检。

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