很多恐友,比较了解窗口期,想知道自己是否感染了艾滋病,进行了艾滋病核酸检测,因为艾滋病核酸窗口期在1周后。在国家卫生健康委发布了国家卫生行业标准:《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》(WS293-2019),增加了核酸试验作为确证诊断方法。并在《全国艾滋病检测技术规范(2020年修订版)》增加了HIV-2核酸检测。
那么什么是艾滋病的核酸检测呢?
从概念上来说,艾滋病核酸检测,直击艾滋病病毒的RNA或DNA结构,检测血液中是否存在病毒核酸,诊断有无病原体感染。
艾滋病核酸检测常用的方法有哪些?主要分为定性和定量试验。均可作为HIV感染诊断试验,不同的方法,检测结果判定和报告也是不同的。
1、HIV-1核酸定性检测:包括RNA检测和DNA检测。检测方法主要有实时荧光定量PCR方法、荧光探针PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反应为基础的核酸扩增PCR方法。
检测结果显示“有反应”或“检测到”,报告核酸阳性;检测结果显示“无反应”或“未检测到”,报告核酸阴性。核酸定性检测阴性不能排除HIV-1感染,还需要根据流行病学史、临床表现和实验室其他相关指标进行诊断。
2、HIV-1核酸定量检测:RNA检测主要是定量检测血浆中的病毒RNA,检测的主要原理是实时荧光定量PCR。DNA检测包括全血、干血斑、PBMC及组织中DNA检测,同定性检测一样,DNA含量测定主要有荧光探针PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反应为基础的核酸扩增PCR方法。另外近几年迅速发展起来的一种核酸绝对定量分析技术——数字PCR也可用于HIV核酸定量检测,虽然2020修订版的规范中还没有说明,但相信这种技术在艾滋病领域也会很快发展起来。
对于检测结果:当检测值>5000CPs/ml(或IUs/ml),报告检测值;检测值≤5000CPs/ml,再次采样检测后报告检测值,结果>5000CPs/ml可以作为诊断依据,结果仍≤5000CPs/ml,则需结合流行病学史、临床病史等结果进行综合判断。检测值小于检测下线,报告低于检测限。划重点!对于暴露前或暴露后预防用药的个体,检测值低于最低检测限不能排除HIV-1感染,需要根据其他相关指标进行综合判断。
3、HIV-2核酸检测:HIV-2核酸检测包括DNA定性、定量,RNA定性、定量(病毒载量)及总核酸检测。
当疑似HIV-2感染、HIV-2抗体确证检测结果为不确定,或者需要区分HIV-1和HIV-2感染,需要判定是否为HIV-1/HIV-2双重感染时,可以检测HIV-2核酸进行诊断。
HIV-2前病毒DNA(以下简称DNA)、RNA和总核酸(DNA/RNA)检测结果均可用于HIV-2感染诊断。HIV-2感染者和艾滋病病人血浆中HIV-2RNA检出率低,病毒载量水平也低,例如,一个西非的队列研究结果显示,在未接受过抗病毒治疗的HIV2感染者和艾滋病病人申,血浆HIV-2病毒载量未检出(<10cps/mL)的占46.5%,病毒载量为10-100cps/mL、100-1000cps/mL和>1000cps/ml的分别占35.8%、11.7%和6.0%。因此,建议优先选择检测HIV-2DNA或总核酸。HIV-2核酸阴性或低于检测限时,不能排除HIV-2感染。
常用的HIV-2核酸检测方法有2类,实时荧光PCR和套式PCR。承担美国HIY3核酸检测的两家实验室(美国纽约州加生局Wadsworth中心和华盛顿大学)均使用实时荧光PCR,HIV-2特异性靶标均为长末端重复序列(LTR)的保守区但位置不同;法国ANRS-C05HIV-2和ANRS-AC11定量工作组(以下简称ANRS项目组,其中ANRS为国家艾滋病和病毒性肝炎研究所)也使用实时荧光PCR,但HIV-2特异性靶标为LIR和gag基因保守区,以上方法均可覆盖HIV-2的A、B流行亚型。国内主要利用套式PCR护增HIV-2LTR和gag等基因的保守区片段,PCR产物经测序、序列比对后进行HIV-2感染诊断。
如果网友们,想尽快知道自己感染艾滋病与否,可以在行为一周后,到大医院或传染病医院或CDC(疾控中心)进行艾滋病核验检测。最后本中心祝大家身体健康,万事如意! 最后祝广大恐友们,早日脱恐,工作愉快,生活开心。